■ 产品简介
本试剂盒是利用拓扑异构酶I(Topoisomerase I)的切割再连接的原理，将片段克隆到载体中；此外，添加有去A酶，使得本载体对带A尾或平末端的PCR产物都可连接，并且连接效率无差异。即适用于克隆由庄盟K5(ZT211)、Pfu和KOD等高保真DNA聚合酶扩增的平末端PCR产物，也可克隆由庄盟F5(ZT213)、Taq、Taqplus、Tth和klenTaq等DNA聚合酶扩增的带A尾的PCR产物。可以用引物M13F和M13R进行菌落PCR鉴定阳性克隆。
■ 产品亮点
1.无需繁琐蓝白斑筛选，阳性克隆率＞95%
2.操作简单,仅需加入5×ZTOPO Mix和样品,5分钟完成连接；
3.适用于平末端 PCR 产物和带 A 尾的 PCR 产物；
4.可以连接长达10kb片段（对6kb以内片段，有超过90%的阳性率）
5.克隆位点两旁都有 EcoR I 和 EcoR V 酶切位点，适合单酶切鉴定
6.本载体使用Topo异构酶进行连接，酶切片段需去磷酸化。
■ 储存
－20℃至少保存8个月，4℃可短时间保存（不超过30天）。
■ One step ZTOPO-Blunt/TA 载体测序引物序列
M13F: TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R: CAGGAAACAGCTATGACC
注1：“M13通用引物”有多种不同的序列，且个别引物合成公司默认的M13引物与此载体所用的M13序列有差异，合成使用前务必先核对序列。
注2：个别常用酶切位点说明PstI 9、HindIII 624、ScaⅠ 2475
注3：载体全序列请详见公司官网
■ One step ZTOPO-Blunt/TA载体图谱
■ One step ZTOPO-Blunt/TA载体多克隆位点序列
