产品介绍
本产品以总RNA或miRNA为模板,先通过Poly(A)聚合酶在miRNA的3`端加多聚A尾,随后使用Universal Oligo(dT) Primer进行逆转录反应,最终生成miRNA对应的cDNA第一链。
产品特点
操作简单:在一管中即可同时完成加尾和逆转录。
特异性强:POLY(A)聚合酶特异性识别单链miRNA,最大限度降低miRNA前体的逆转录;逆转录引物设计为茎环结构,减少了PCR时的非特异性扩增。
逆转录效率高:逆转录酶无RNase H活性,具有更高的逆转录效率和灵敏度。
产品应用
以总RNA或miRNA为模板,进行加A尾法逆转录,产物用于RT-PCR、荧光定量PCR。
实验案例
1、一步完成加尾和逆转录反应。
2、优异的逆转录特异性
以水稻miRNA为模板,使用本产品与某T公司和某V公司同类产品进行反转录,得到的cDNA进行荧光定量检测osa-miR156a。可以看到,使用本产品得到的融解曲线为单峰,同类产品得到的融解曲线为双峰。
3、优异的灵敏度和稳定性
使用本产品反转录小鼠肝miRNA,之后用荧光定量检测hsa-miR-30a-3p。结果显示,反转录产物的灵敏度和稳定性均良好。
扩增曲线 | 融解曲线
|
|
|
小鼠肝miRNA浓度:226ng/uL,取1 uL反转录(反转录体系:20 μL),将cDNA原液分别稀释101-105,取2 μL 进行qPCR,q-PCR试剂:2×HQ SYBR qPCR Mix (Without ROX)荧光定量试剂(ZF501)。