产品介绍:
本公司生产的K1克隆感受态细胞源于优选的Turbo菌株。该菌株是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化,使用pUC19质粒检测,转化效率可达1×109cfu/μg DNA。K1克隆感受态细胞中突变的ΔlacZM15基因产物与载体携带的β-半乳糖苷酶基因表达产物实现α互补,加入lacIq基因更严谨的控制Lac启动子的开启,从而极大的降低了蓝白斑筛选中的假阳性率。此外,K1克隆感受态细胞中endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取,且质粒得率要高于其他常用克隆菌株。本菌株具有T1噬菌体抗性(fhuA2)。
基因型为:F' proA+B+ lacIq ΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10)TetS endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
产品特点:
1、转化效率可达1X109
2、质粒提取得率比DH5a高20%
3、6小时见斑
4、10分钟完成感受态细胞转化(氨苄抗性质粒)
实验数据:
1.K1和DH5α转化连接产物对比:
分别使用K1和DH5α进行连接产物转化,在6h左右,K1可见斑,7小时后可挑单克隆进行菌落pcr。
对比图如下:

2.K1和DH5α提质粒对比
跑胶结果如下:

挑取单斑下提取质粒图:1-6分别为7h的DH5α,7h的K1,8h的DH5α,8h的K1,过夜的含氨苄抗性质粒的DH5α,K1。
实验结果如下:
单克隆菌落摇菌时间 | K1 Od600 | 质粒浓度ng/μl | DH5α Od600 | 质粒浓度ng/μl |
7h | 4.8 | 314.1 | 4.28 | 282.6 |
8h | 5.4 | 356.5 | 4.8 | 290.0 |
过夜 | 5.58 | 559.3 | 4.94 | 464.3 |
感受态快转方法:
10min 快速转化方案(适用范围:氨苄抗性质粒)
1.取感受态细胞置于冰浴中(解冻1-2分钟),加入目的DNA(质粒或连接产物),轻轻混匀,在冰浴中放置5分钟。
2.将离心管置于42℃水浴中放置60秒,然后快速将离心管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3分钟,该过程不要摇动离心管。
3.吸取全部感受态细胞加到含Amp抗生素的 LB 固体琼脂培养基上,将感受态均匀涂开。
4.倒置平板,37°C培养 12-16小时。