产品简介:
PicoGreen与DNA双链结合后才发出荧光,无DNA不发荧光;所发荧光与DNA浓度成正比。常规的DNA含量的检测方法是在260nm(A260)处测其吸光值,主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大,还会受到核酸制备过程中污染物的干扰,无法区分DNA和RNA,且不灵敏(5μg/mLdsDNA溶液A260=0.1)。PicoGreen定量检测方法简单、方便,被多家生物制品厂选择,成为生物制品残留DNA检测的标准。
在2010年《中国药典》中提出,PicoGreen定量DNA的方法检出限约0.3ng/ml,DNA含量在1.25-80ng/mL范围时线性较好(R2>0.99).
1)该方法可以测定来源于任何表达宿主样品中的双链DNA。
2)可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
3)远远超出传统紫外A260的检测方法和Hoechst33258的灵敏度。
4)较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖对测定无影响。
5)在等摩尔浓度 ssDNA 和 RNA 存在的条件下测定 dsDNA,影响很小。