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产品名称:GREENspin 超快动物组织/细胞RNA提取试剂盒GREENspin Fast Animal Tissue/Cell Total RNA Kit(ZP441)

货号 规格 价格 订购数量 是否现货
ZP441-1 50T 900 - + 有货
ZP441-2 100T 1620 - + 有货

产品简介

本产品用于从动物组织、细胞提取总RNA。独特的裂解液迅速裂解样本并灭活RNA酶,裂解产物通过gDNA过滤柱有效地去除杂质和gDNA,滤液中的RNA经过乙醇调节上柱条件,高效地结合到RNA吸附柱,经过漂洗和洗脱,得到的总RNA纯度高,gDNA残留少,无蛋白和其他杂质污染,可用于RT-PCR、Real-Time PCR、芯片分析等多种下游实验。


产品特点

1. 绿色无毒:避免使用有毒的苯酚、氯仿等试剂。

2. 操作简捷:提取步骤少,可在10min内完成单个样品RNA的提取。

3. 基因组残留少:独特的gDNA过滤柱可以有效地去除杂质和gDNA,无需DNase柱上消化。


操作对比



实验案例

1. 提取得率参考

样本

提取量

RNA得率

小鼠肝脏

10mg

14μg

小鼠尾

20mg

4.5μg

小鼠大肠

30mg

25μg

小鼠心脏

10mg

3μg

小鼠脑

10mg

3μg

比目鱼肝脏

50mg

43μg

beas-2b细胞

3×106

16.3μg

RAW细胞

3×106

16.5μg

293T细胞

1×106

12.5μg


2. 产品对比


使用各产品对不同组织、细胞样本提取的RNA进行琼脂糖凝胶电泳检测。M表示DL2000,Z表示ZP441,T表示Trizol,V、A、P表示其它同类产品。可以看到,ZP441提取效果≥其它同类产品。




问题

可能原因解决方案
RNA降解

样本保存不当

选择新鲜或未反复冻融的样本

样本选择不当

海洋动物组织如比目鱼、蛤蜊等提取效果不佳
电泳环境污染
确保电泳槽、琼脂糖凝胶和缓冲液等进行RNase-free处理

洗脱液污染

更换新的RNase-free ddH2O
gDNA污染
样本投入量过多
样本投入量不超过说明书要求的量,富含DNA的组织如肝脏等需减少样本量

研磨仪处理样本

实验发现,研磨仪处理液氮冷冻后的样本,可能会导致DNA的残留

下游实验要求严格

采用DNase I柱上消化(ZP430)
吸附柱堵塞

样本投入量过多

减少样本投入量,适当增加裂解液TCR量

样本富含纤维

按照纤维组织裂解操作

研磨/匀浆不充分
充分研磨/匀浆,或者先12,000 rpm离心5min,取上清上柱
RNA产量低

研钵投入量过少

增加样本投入量,或者增加洗脱效率

研磨/匀浆不充分

充分研磨/匀浆,延长裂解时间

洗脱不当

RNase-free ddH2O应加至吸附柱膜上;增加洗脱效率
RNA纯度低

盐离子残留

沿吸附柱管壁四周加入加入漂洗液RW,或者增加1次漂洗步骤

乙醇未挥发完全

提取步骤8,将吸附柱放入到离心管后,开盖放置2min,充分挥发掉乙醇


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