▋产品简介：
膜系统酵母双杂交原理：基于分离的泛素(split-ubiquitin)介导的膜蛋白酵母双杂交系统可用于膜蛋白-膜蛋白或膜蛋白-可溶性蛋白之间的互作检测，也可以进行文库筛选。泛素分子被分为 Cub 和 NubG 两个结构域，各自连接一个已知诱饵蛋白和猎物蛋白且在膜上正常表达。Cub 一端连接转录激活因子LexA-VP16处于细胞质侧，当已知诱饵蛋白和猎物蛋白存在相互作用时，由于蛋白互作使NubG 和 Cub 在空间上接近，从而形成一个完整的泛素分子，导致细胞质侧的转录激活因子LexA-VP16 被UBPs 切割，游离的LexA-VP16进入细胞核，激活 His3、Ade2 与 LacZ 表达，可用相应的缺陷培养基和 β-半乳糖苷酶显色试剂盒筛选有相互作用的蛋白。UBPs 作为泛素化蛋白降解系统的重要组分，仅存在于细胞质中。DUAL membrane 系统依赖于 bait (Cub-LexA-VP16) 和 prey (NubG) 在细胞质被 UBPs 识别。因此需要对诱饵蛋白精确定位后选择合适的载体，载体选择参考表 1。
功能验证：NubI 为野生型的ubiquitin 的 N 端结构，保留了原始的三个 I 氨基酸结构，NubI 可以不依赖蛋白的互作能够直接与 Cub 结合，从而激活下游的报告基因。将 pBT3-Bait 和 pOST1-NubI 质粒共转化NMY51，涂布 DDO 、TDO 和 QDO 平板。在 DDO 平板有菌落生长，说明两个质粒共转成功；在 TDO 和QDO 平板有菌落生长，说明 bait 质粒能够适应 ubiquitin 系统，功能验证通过，可以进行下一步验证实验。如果功能验证结果不通过，则需要重新更换 bait 载体。
自激活检测：NMY51[pBT3-N-Bait+pPR3-N]在 DDO 上生长，说明两个质粒均成功转入酵母菌株中，在 TDO 有轻微生长，在 QDO 培养基上不生长，说明 pBT3-N-Bait 在 NMY51 酵母菌株中有轻微自激活活性，也可以进行后续筛选。
▋运输及储存条件：
培养基系列保质期2年，鉴定试剂盒、甘油菌保质期1年，感受态保质期3个月；感受态干冰运输，其余产品冰袋运输；各类产品按照标签所示温度进行储存。
