■ 产品简介
本公司生产的EBY.VW4000感受态细胞经特殊工艺制作,可用于DNA的化学转化,,pYES2质检测转化效率高达104cfu/μg DNA,-80℃可保存三个月。
基因型:CEN.PK2-1C, MATa, hxt13Δ::loxP, hxt15ΔloxP, hxt16Δ::loxP, hxt14Δ::loxP, hxt12Δ::loxP, hxt9Δ::loxP, hxt11Δ::loxP, hx10Δ::loxP, hxt8Δ::loxP, hxt4-1-5Δ::loxP, hxt2Δ::loxP, hxt3-6-7Δ::loxP, gal2Δ::(ura3/FOA), stl1Δ::loxP, agt1Δ::loxP, mph2(ydl247w)Δ::loxP, mph3( yjr160c)Δ::loxP
■ 产品特点
EBY.VW4000菌株来源于CEN.PK2-1C酵母菌株,MATa型,Transformation marker为ura3,可用于筛选标记为URA3的质粒的转化,比如pYES2/NT、pYC2/NT、pDR196、p416GDP、pESC-URA等质粒。酿酒酵母含有大量严格控制的具有不同特征的己糖转运蛋白,这些己糖转运蛋白有转运葡萄糖的潜力,大部分酵母中含有17个己糖转运蛋白(Hexose transporter)HXT1 - HXT17,CEN.PK2-1C只含有16个己糖转运蛋白(Hexose transporter)HXT1-HXT16;GAL2:半乳糖渗透酶基因,为半乳糖利用所必须,同时具有运输葡萄糖的功能;还有三个麦芽糖转运蛋白家族成员(Agt1、Ydl247、Yjr160)能够运输己糖;此外,STL1(Sugar Transporter-Like protein)为质膜甘油质子同向转运体,也被认为参与到葡萄糖的转运代谢过程中。为了消除CEN.PK2-1C酵母对葡萄糖的摄取能力,利用Cre/LoxP系统将HXT1 - HXT16、GAL2、AGT1、YDL247w和YJR160c这些能够运输己糖的基因,加上STL1共21个基因全部删除,即是EBY.VW4000。EBY.VW4000作为己糖转运蛋白缺陷酵母菌株,其葡萄糖的吸收和转运活性被完全消除,其他己糖的吸收和转运能力也被消除,是发现和研究天然或异源(其他物种)己糖转运蛋白的高效试验平台。EBY.VW4000不能同化葡萄糖或其他己糖作为碳源,在含有2%麦芽糖的培养基中生长正常,培养WT细胞推荐使用YPM培养基;筛选含有质粒的酵母细胞推荐使用SM培养基。