产品简介:
DO Supplement(Dropout Supplement),是由必需氨基酸和两种核苷酸组成的混合物,用于制备 SD 培养基(synthetic dropout medium—由YNB(无氨基酸)、葡萄糖、氨基酸和核苷酸分子配制而成)。任何一种DO Supplement都缺失一种或多种成分,借此来筛选可以表达该成分的菌株或用来激活相关报告基因。
DO Supplement(缺陷氨基酸混合物)系列为即用型粉剂,不能单独使用,需配合Minimal SD Base培养基,或YNB(无氨基酸)、葡萄糖配置成SD缺陷培养基使用。
使用方法:
1、SD配置
(1)①按照标签称取DO Supplement(约1.3g,具体参考产品标签)加入1L去离子水中,再加入26.7g Minimal SD Base
或
②按照标签称取DO Supplement(约1.3g,具体参考产品标签)加入1L去离子水中,然后分别加入 6.7g YNB、20g葡萄糖
(2)搅拌溶解,调节 pH 至 5.8。
(3)121℃高压灭菌 15min,室温冷却后使用,或4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。
或者
1. 在900ml 去离子水中加入1.3g 的DO 培养基,然后再加入6.7g YNB,搅拌溶解;
2. 无需调节pH,121℃高压灭菌15min;
3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基;
4. 使用时再加入100ml 已灭菌的20%葡萄糖。
2、SD Agar配置
(1)①按照标签称取DO Supplement(约1.3g,具体参考产品标签)加入1L去离子水中,再加入46.7g Minimal SD Agar Base
或
②按照标签称取DO Supplement(约1.3g,具体参考产品标签)加入1L去离子水中,然后分别加入 6.7g YNB、20g葡萄糖,20g琼脂粉。
(2)搅拌溶解,调节 pH 至 5.8。
(3)121℃高压灭菌15min,冷却到50-60℃,把培养基倒入平板中,室温使其凝固后使用,或封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。
注意事项:
1. 在配制酵母SD缺陷培养基时,葡萄糖在灭菌时会有炭化变色现象,培养基由浅黄到深褐色不等,对酿酒酵母的生长不会产生严重影响。
2. 葡萄糖高温灭菌会有碳化现象,可使用115℃灭菌15-20min,或灭菌后及时取出,控制好灭菌温度和时间,以减缓碳化变色。
3. DO和SC培养基均不含葡萄糖,如有特殊要求(如毕赤酵母)可将20%葡萄糖单独灭菌,待使用时再加入。
4. 酵母SD 缺陷培养基的pH 值在5.5-6.5 范围内都是比较适合酵母生长的,本公司缺陷培养基pH已经过调试,使用时只需要稍微调整即可。
5. 本产品成分比较复杂,多为易吸潮的成分,称取完后已及时旋紧瓶盖,并置于干燥避光处储存。严重结块后请停止使用。