产品简介:
SD+缺陷型氨基酸混合物是由Minimal SD Base与缺陷氨基酸混合物混合而成,如SD/-His Broth即Minimal SD Base混合了DO Supplement-His。用做筛选培养基,用于选择培养含有特异载体的酵母或进行杂交筛选。又如,SD/-Leu Broth,SD/-Trp Broth分别用于筛选bait和prey载体(bait和prey载体带有合成色氨酸和亮氨酸的基因)。携带这两个载体的酵母细胞可以在双缺筛选培养基SD/-Leu/-Trp生长,而不含有这两个基因的亲代酵母菌株(如Y2H Gold)不能生长。
使用方法:(新配方不用调节PH值)
(1). 在500ml去离子水中加入1袋(0.5L规格)SD +缺陷型氨基酸混合物,搅拌溶解。
(2). 121℃高压灭菌15分钟。
(3). 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。
注意事项:
1.GAL1启动子诱导表达要选用Minimal SD Agar Base Gal/Raf培养基。
2.在配制酵母缺陷培养基时,培养基会变色,由浅黄到深褐色不等,对酵母的生长不会产生严重影响。
3.Minima SD Agar Base Gal/Raf培养基高温高压下可能对诱导效果产生抑止,尤其是在做表达调节介导的功能互补实验需特别注意!
● 如果需要制备固体平板,可购买相关SD +缺陷型氨基酸混合物 with Agar试剂;
或者配置时自行添加Agar,务必选用优质Agar,添加量为20 g/L。冷却到50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。
● 为什么我做的平板不凝?
自行添加Agar,务必选用优质Agar,添加量为20 g/L。固体培养基不凝固可能是由于pH值偏低或者灭菌时间过长(也会降低pH值);水质偏酸也会使得培养基偏酸,建议灭菌前调整SD系列培养基的pH至5.8。121℃,高压灭菌15min,及时从灭菌锅内取出培养基。