■ 产品简介
零背景ZT4-Blunt克隆试剂盒是专门对平滑末端DNA片段或PCR扩增产物进行高效克隆的一种阳性筛选系统。该克隆载体包含一个致死基因,当目的DNA片段插入克隆位点时,该致死基因被破坏,故仅带插入目的片段的克隆才能生长形成白色菌落,无需加入IPTG及X-Gal进行蓝白斑筛选;克隆阳性率超过95%。
■ 产品亮点
·可5min快速连接,且克隆效率超过95%
·无需IPTG及X-Gal进行蓝白斑筛选
·PCR扩增产物无需磷酸化
·酶切产物无需去磷酸化
·专用于平滑末端DNA片段或PCR扩增产物
·特别适合Pfu、KOD等系列产物的克隆
1.制备片段
| ★平端片段(Pfu、KOD等扩增产物) |
★片段浓度最低可至5ng/μL |
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2.与载体混合加入连接酶
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★实现5min快连
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★最长可连接10kb片段(即使5kb片段,也已超过95%的阳性率)
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★载体稳定性极高,反复冻融影响极低 |
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3.转化
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★采用先进的自杀基因筛选技术无需繁琐蓝白斑筛选,阳性克隆率接近100%
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■ 菌落PCR
■ 储存
-20℃下至少保存1年。
■ ZT4-Blunt载体测序引物序列
Forward Sequencing Primer,20-mer:5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’
Reverse Sequencing Primer,24-mer:5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’
■ ZT4-Blunt载体图谱
■ ZT4-Blunt载体多克隆位点序列