庄盟生物

当前位置:首页 - 产品中心 - 酵母研究相关产品

产品名称:3-AT(3-氨基-1,2,4-三唑)(ZCS104)

货号 规格 价格 订购数量 是否现货
ZCS104 5g 98 - + 有货

产品简介:

HIS2作为报告基因时,会有一定程度的泄漏性表达,出现背景过高的现象,一般称作自激活。这时可以在筛选培养基中加入适量的HIS2竞争性抑制剂3-AT(3-amino-1,2,4-triazole),以降低背景;或者增加一个筛选标记Ade来进行更加严格的筛选。加入的3-AT浓度过高,蛋白间比较弱的相互作用也可能被抑制,因此需要筛选确定3-AT的最适浓度。

本公司的3-AT溶液为经过过滤除菌的即用型母液,用于酵母杂交实验抑制本底表达,用以准确筛选出蛋白互作引发的His的报告基因的表达。


使用方法:

1.计算所需平板的数量,计算配置培养基体积;

2.设置3-AT的浓度梯度(建议10-50 mM 的浓度范围设3-5个梯度,常用浓度约30 mM);

3.灭菌筛选培养基,待培养基冷却到55 ℃左右,加入3-AT母液,摇匀后倒板;

4.标记每个平板的3-AT浓度,超净台冷却凝胶后,按单位面积单个克隆计算培养物浓度,涂板;

5.28-30 ℃培养3-5天,筛选出最佳3-AT浓度,用于后期互做筛选。


储存条件:

1.理想情况10 mM浓度的3-AT平板会有少量生长,20 mM浓度的3-AT不能或极少生长。如果在80 mM浓度的3-AT平板上生长酵母,说明自激活活性太高,不能用于双杂交筛选。

2.诱饵蛋白能够单独激活报告基因的表达,该蛋白如果是具有转录激活域一个转录因子,需要去掉转录激活结构域。如果不是转录因子但仍具有较强的转录激活活性,需要将诱饵蛋白具有激活活性的区域去除,但这样操作有可能影响蛋白间的互作。


储存条件:

-20 ℃储存,有效期24个月。


用户姓名: *
用户手机: *
电子邮箱:
单位名称: *
留言内容: *
验证码: 看不清,换一张 *
 
订单提交
尊敬的用户,您好,请您再次确认以下订购商品,点击提交按钮,会提交到后台管理员,我们会在收到您的订购信息后,一小时内跟您电话确认,请保持电话畅通!(注册会员可享更多优惠!)
总价格:¥2000