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产品名称:X-α-gal (X-a-gal)5-溴-4-氯-3-吲哚-a-D-半乳糖苷(ZCS106)

货号 规格 价格 订购数量 是否现货
ZCS106-1 10mg 198 - + 有货
ZCS106-2 100mg 780 - + 有货
ZCS106-3 1g 3680 - + 有货

产品说明:

 X-α-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚基-α-D-吡喃半乳糖苷)是α-半乳糖苷酶(MEL1)的显色反应底物,更为常见的X-Gal是β-半乳糖苷酶(LacZ)的显色反应底物。α-半乳糖苷酶可水解无色的X-α-Gal底物,并生成蓝色的产物。通过肉眼可见的蓝白斑筛选,可快速而简便的识别阳性克隆。

 MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码外泌型的α-半乳糖苷酶。如果蛋白无互作,报告基因MEL1不表达,菌落呈乳白色;如果蛋白发生互作,报告基因MEL1表达,菌落呈蓝色,亦可根据菌落蓝色深浅,初步判断蛋白互作强度。

 X-α-Gal与缺陷型筛选平板同时使用,可有效提高筛选效率,排除假阳性克隆,主要应用于酵母双杂交实验GAL4酵母表达系统中蛋白互做的阳性克隆的检测。也可用于筛选含α-半乳糖苷酶基因细菌菌株;区分肠杆菌科内的不同菌种,以及区分双歧杆菌和乳酸菌;组织化学中用于酶活性的检测等。


母液配制:

X-α-Gal母液(20 mg/mL):取20 mg X-α-Gal溶于1 mL DMF,或等比例放大,过滤除菌。


使用方法:

涂布于预制平板:

1. 用DMF稀释X-α-Gal母液至4 mg/mL。或溶解24 mg X-α-Gal于6 mL DMF,终浓度为4 mg/mL。

2. 涂布200 μL(φ15 cm) 或者100 μL(φ10 cm)X-α-Gal储存液于预制平板上;

3. 置于37 ℃培养箱至液体被吸收(DMF挥发性差,最长可放4小时);

4. 将转化细菌或酵母涂于平板上,于37 ℃或30 ℃培养直至蓝色菌斑出现。

直接加入培养基:

1. 将已灭菌固体培养基冷却至50-55 ℃;

2. 100 mL固体培养基加入100-200 μL X-α-Gal母液混匀,快速倒平板。

携带MEL1基因的酵母菌株:

Y2HGold、Y190、AH109、Y187、PG69-2A。


储存条件:

-20 ℃避光储存,未开封有效期12个月。


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