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产品名称:金担子素A(ZCS108)

货号 规格 价格 订购数量 是否现货
ZCS108-1 1mg 1298 - + 有货
ZCS108-2 5×1mg 5200 - + 有货

金担子素A(Aureobasidin A,AbA)是从丝状真菌 Aureobasidium pullulans No. R106 中分离出来的环酯肽类抗生素,具有很强的抗真菌能力。AbA 作用机制是抑制酵母中 AUR1 基因(1,2)编码的肌醇磷酰胺(inositol phosphorylceramide,IPC)合成酶的活性,干扰鞘脂合成,从而杀死菌株。AbA在较低的浓度下(0.1-0.5 μg/mL)即可对酵母产生毒性。编码IPC合成酶的基因研究较多的来自酿酒酵母菌的AUR1基因,以及构巢曲霉的AURA基因,两者具有同源性。通过对编码 AUR1-C基因进行突变即可使得菌株对AbA产生抗性,作为蛋白质互作研究的报告基因。

因为AbA可以直接杀死敏感的酵母菌株,而不是延迟菌株生长,所以AbA筛选有利于阳性克隆的生长和识别。与营养报告基因(如 HIS3)进行低严紧度初筛相比,AbA筛选大大消除了背景克隆。实际操作中,用AbA进行初筛时会获得更多克隆,之后再用 4 个报告子(AUR1-C,HIS3, ADE2 和 MEL1)进行高严紧度的二次筛选以验证阳性克隆。AbA非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记;也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子,可以简化酵母双杂交文库筛选。MEL1和lacZ分别编码 a-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷酶,可以作用于相应的底物X-a-Gal和X-Gal使酵母变蓝。其中,a-半乳糖苷酶是外分泌酶,在酵母表面就能直接检测到;β-半乳糖苷酶是内分泌酶,需要将酵母破碎后才能检测到。用蓝斑显示酵母细胞内两个蛋白的相互作用的方法不仅具有较高的敏感性,而且蓝斑的深浅还可以反映两个蛋白相互作用的强弱。


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