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产品名称:酵母转化PEG/LiAC混合液(ZCS116)

货号 规格 价格 订购数量 是否现货
ZCS116-1 5ml 80 - + 有货
ZCS116-2 50ml 470 - + 有货
ZCS116-3 100ml 800 - + 有货

产品说明:

本产品主要用于酿酒酵母感受态细胞的转化实验。PEG/LiAC 有利于酵母细胞吸收质粒DNA,从而提高酵母的转化效率。


使用方法:

1.5mL体系:

1. 在含有约100ng质粒的1.5mL无菌离心管中,加入5uL预变性的 Carrier DNA,50uL酵母感受态细胞,500uL LiAc/PEG3350混合液轻柔混匀。

2. 30℃水浴30 min,每10 min 混匀一次。

3. 每管加入20 uL DMSO,轻柔混匀。

4. 42℃水浴热激15 min,每5 min上下颠倒混匀一次。

5. 700 g离心5min。

6. 弃掉上清,用1 ml YPD Plus液体培养基重新悬浮,30℃摇床震荡培养30-60min。

7. 700 g 离心5min。加入0.5mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。

8. 涂布于相应的缺陷型培养基上。

9. 30℃恒温培养3-5天。


15mL体系:

1. 在含有约5-15ug质粒的15mL无菌离心管中,加入20uL预变性的 Carrier DNA,600uL酵母感受态细胞,2.5mLLiAc/PEG3350混合液轻柔混匀。

2. 30℃水浴 45 min,每10 min 混匀一次。

3. 每管加入160uL DMSO,轻柔混匀。

4. 42℃水浴热激20 min,每5 min 上下颠倒混匀一次。

5. 700 g 离心5min。

6. 弃掉上清,用3 ml YPD Plus 液体培养基重新悬浮,30℃摇床震荡培养90min。

7. 700 g 离心5min。加入15mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。

8. 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。

9. 30℃恒温培养3-5天。


注意事项:

1. 注意无菌操作,避免微生物污染。

2. 酵母制备过程中尽量在冰上操作,以提高感受态的转化效率。


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