Y2HGold菌株(ZK284)-北京庄盟国际生物基因科技有限公司

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产品名称:Y2HGold菌株(ZK284)

货号 规格 价格 订购数量 是否现货
ZK284 0.3ml/支 650 - + 有货

■ 基因型

MATa,trp1-901,leu2-3,112,ura3-52,his3-200,gal4Δ,gal80Δ,LYS2::GAL1UAS-Gal1TATA-His3,GAL2UAS-Gal2TATA-Ade2URA3: :MEL1UAS-Mel1TATAAUR1-C MEL1


基本信息

培养基:YPDA

菌株类别:酵母菌

培养条件:28℃,有氧,YPDA

质粒转化:电激/42℃热激

保存方式:30%甘油,-80℃

基本应用:用于酵母双杂交


菌株简介

Y2HGold菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母双杂实验用菌株,MATa型,可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过mating操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation  marker为: trp1, leu2,报告基因为:AbAr, HIS3, ADE2, MEL1。

Y2HGold -GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用:PGBKT7和PGADT7。质粒PGBKT7的筛选标志为TRP1,用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1 ~ 174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白;质粒PGADT7的筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C端768 ~ 881 位氨基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4系统原理:一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域:位于N端1 ~ 174位氨基酸区段的DNA结合域(DNA-BD)和位于C端768 ~ 881 位氨基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD单独存在不能激活转录,但当二者接近时,则呈现完整的GAL4活性,使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下,BD不与AD结合,将要检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成bait 融合蛋白(bait -BD)和 prey 融合蛋白(prey-AD),如果 bait 和 prey发生相互作用,就会促使 BD 和 AD 的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。

Y2HGold有四个报告基因:AbAr, HIS3, ADE2, MEL1,分别由三种不同的启动子(G1,G2,M1)启动,这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分均不同,大大降低了酵母双杂假阳性发生的概率。此外新报告基因AbAr与以前的营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点,也可以降低酵母双杂假阳性发生的概率。