■ 基本信息
别名: | pET30a |
启动子: | T7 |
复制子: | pBR322 |
终止子: | T7 terminator |
质粒分类: | 大肠系列质粒；大肠表达质粒；pET系列质粒 |
质粒大小: | 5422bp |
质粒标签: | N-6×His, N-S, N-Thrombin, N-EK, C-6×His |
原核抗性: | Kan |
克隆菌株: | DH5a |
培养条件: | 37℃，有氧，LB |
表达宿主: | BL21(DE3)等大肠杆菌 |
诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
5'测序引物: | T7：TAATACGACTCACTATAGGG |
3'测序引物
| T7-ter：TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
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备注: | 常用的大肠杆菌表达载体 |
■ 质粒属性
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF
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片段物种: | 空载体
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原核抗性: | Kan |
真核抗性: |
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荧光标记: |
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■ 质粒简介
pET-30a质粒是一种原核表达载体，C端含有一个6×His affinity标签，N端含有一个thrombin位点、6×His affinity标签、EK标签和S标签。该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。
pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能最强大的系统，也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下，可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。
The pET-30a-c(+) vectors carry an N-terminal His• Tag®/ thrombin/ S• Tag™/ enterokinase configuration plus an optional C-terminal His• Tag sequence. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circular map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer.
质粒只保证关键序列正确，不保证表达效果。
■ 质粒图谱
■ 质粒序列
质粒序列请下载：
ZK167pET-30a大肠表达质粒.txt
