■ 产品介绍
EPI300细胞含有一个突变的trfA基因,该基因表达出的蛋白产物可以促进含有ori V复制子的质粒的高拷贝扩繁,诱导剂Ⅰ可以诱导trfA基因的表达。当含有ori V复制子质粒的EPI300细胞在LB/2YT或SOB培养基中生长时,trfA基因的表达被抑制,ori V复制子质粒的拷贝数维持在很低的水平;当在培养基中加入诱导剂Ⅰ,ori V复制子质粒的拷贝数可维持在很高的水平,提高了质粒产量。因此EPI300菌株可以降低ori V复制子质粒的拷贝数,特别适合于各种不稳定 DNA 或毒性基因的克隆。 [mrr-hsdRMS-mcrBC]基因型使EPI300菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA(例如:哺乳动物基因组DNA)。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。lacZΔM15 标记的存在使EPI300可用于蓝白斑筛选,rpsL赋予其链霉素抗性。 |
基因型: | F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA dhfr |
■ 基本信息
抗性: | 硫酸链霉素(Str) |
培养基: | LB |
菌株类别: | 大肠杆菌 |
培养条件: | 37℃,有氧,LB |
质粒转化: | 42℃热激 |
保存方式: | 20%甘油,-80℃ |
基本应用: | 用于基因克隆 |
■ 使用方法
建议超净台内划线涂板,得到单克隆后再进行其他实验操作,避免杂菌污染。
■ 注意事项
1. 本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可,也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。