■ 产品介绍
EGY48菌株是Clontech公司开发的LexA 系统酵母双杂实验用菌株,MATa型,可直接转化质粒进行蛋白互作验证或筛库试验;Transformation marker为: his3, trp1, ura3,报告基因为:LEU2;报告基因UAS(上游激活序列)来源于LexA op(x6),只有当Bait和Prey互作时才能启动LEU2表达 。EGY48-LexA酵母双杂系统系统需要三种质粒配套使用:pLexA、pB42AD、p8op-LacZ。质粒pLexA的筛选标志为HIS3,用于表达DNA-BD(来自原核的202个氨基酸残基组成的LexA蛋白)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白;质粒pB42AD的筛选标志为TRP1,用于表达AD(来自疱疹病毒的88个氨基酸残基组成的B42AD蛋白)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白;报告质粒p8op-LacZ的筛选标志为URA3,报告基因为LacZ,报告基因UAS来源于LexA op(x8) ,只有当Bait和Prey互作时才能启动LacZ表达。EGY48菌株可用YPDA在28℃有氧的条件下培养,然后用30%甘油保藏菌种。 |
基因型: | MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2 |
■ 基本信息
培养基: | YPD/YPDA |
菌株类别: | 酵母菌 |
培养条件: | 28℃,有氧,YPD/YPDA |
质粒转化: | 化转/电转 |
保存方式: | 30%甘油,-80℃ |
基本应用: | 用于酵母双杂交 |
■ 使用方法
收到菌液及时四区划线活化,挑取单克隆在YPD中培养到生长对数中后期加入终浓度30%无菌甘油保种,分装置于-80℃保存,避免反复化冻。建议超净台内划线涂板,避免杂菌污染。
■ 注意事项
1. 酵母菌在YPD培养基上会变粉,是正常现象,可以由此特性鉴别是否为酵母菌。
2. 酵母菌种化冻1-2次活性下降,不建议直接长期保存。
3. 活化保种的种管建议分装保存,反复冻融菌株活力下降。
4. 本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。