■ 产品介绍
Y1HGold菌株是Clontech公司开发的GAL4-AbA酵母单杂系统用菌株，MATα型，可直接转化质粒进行筛库试验。Transformation marker为: ura3，leu2；报告基因为：AbAr。Y1HGold-GAL4-AbA酵母单杂系统需要两种质粒配套使用：pAbAi和PGADT7。质粒pAbAi的筛选标志为URA，用于表达pBait-AbAi construct (1~3个bait DNA序列重复串联后克隆到pAbAi中)；质粒PGADT7的筛选标志为LEU，用于表达AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白（Prey）的融合蛋白。GAL4-AbA酵母单杂系统原理：Aureobasidin A(AbA)是一种环酯肽抗生素，在低浓度(0.1-0.2µg/ml)下即可对酵母产生毒性。基因组中整合了pBait-AbAi的酵母菌株（Bait-Reporter Yeast Strains），当猎物蛋白（Prey）结合到诱饵序列（Bait DNA）上，GAL4 AD就会激活AbAr的表达，从而能够在含有抗生素AbA的培养基上生长。AbAr与营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点，可以降低酵母单杂假阳性发生的概率。在28℃有氧的条件下，Y1HGold菌株在无抗性的YPDA上生长，使用30%的甘油可保藏菌种。 |
基因型： | MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met–, MEL1 |
■ 基本信息
培养基: | YPD/YPDA |
菌株类别: | 酵母菌 |
培养条件: | 28℃，有氧，YPD/YPDA |
质粒转化: | 化转/电转 |
保存方式: | 30%甘油，-80℃ |
基本应用: | 酵母单杂交 |
■ 使用方法
收到菌液及时四区划线活化，挑取单克隆在YPD中培养到生长对数中后期加入终浓度30%无菌甘油保种，分装置于-80℃保存，避免反复化冻。建议超净台内划线涂板，避免杂菌污染。
■ 注意事项
1. 酵母菌在YPD培养基上会变粉，是正常现象，可以由此特性鉴别是否为酵母菌。
2. 酵母菌种化冻1-2次活性下降，不建议直接长期保存。
3. 活化保种的种管建议分装保存，反复冻融菌株活力下降。
4. 本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
5. 为了您的安全和健康，请穿 实验服并戴一次性手套操作。
