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产品名称:Y190菌株

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ZK3719 0.3ml/支 600 - + 有货

产品介绍

Y190菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母双杂实验用菌株,MATa型,可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过mating操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation marker为: trp1,leu2,cyh2;报告基因为:lacZ,HIS3,MEL1。Y190-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用:(pGB和pACT2)或(pGBKT7和pGADT7)。质粒pGB由pGBKT7改造而来,筛选标志为TRP1,用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白;质粒pACT2与pGADT7的结构和功能类似,筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白 (Prey)的融合蛋白。GAL4系统原理:一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域:位于N端1~174位氨基酸区段的DNA结合域 (DNA-BD)和位于C端768~881位氨基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD单独存在不能激活转录,但当二者接近时,则呈现完整的GAL4活性,使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下,BD不与AD结合,将要检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成 bait融合蛋白(bait–BD)和prey融合蛋白(prey-AD),如果bait和prey发生相互作用,就会促使BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。

基因型:

MATa, ura3-52, his3-200, ade2-101, lys2-801, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, cyhr2, LYS2 : : GAL1 UAS-HIS3TATA-HIS3, MEL1 URA3 : : GAL1UAS-GAL1TATA-lacZ


基本信息

培养基:

YPD/YPDA

菌株类别:

酵母菌

培养条件:

28℃,有氧,YPD/YPDA

质粒转化:

化转/电转

保存方式:

30%甘油,-80℃

基本应用:

酵母双杂交


使用方法

收到菌液及时四区划线活化,挑取单克隆在YPD中培养到生长对数中后期加入终浓度30%无菌甘油保种,分装置于-80℃保存,避免反复化冻。建议超净台内划线涂板,避免杂菌污染。


注意事项

1. 酵母菌在YPD培养基上会变粉,是正常现象,可以由此特性鉴别是否为酵母菌。

2. 酵母菌种化冻1-2次活性下降,不建议直接长期保存。  

3. 活化保种的种管建议分装保存,反复冻融菌株活力下降。

4. 本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。

5. 为了您的安全和健康,请穿 实验服并戴一次性手套操作。

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