■ 产品介绍
菌株为粪肠球菌,冻存管磁珠保存。
培养条件:营养琼脂、细菌保存培养基或胰酪胨大豆琼脂培养基, 35℃ 培养 24—48 小时。保存温度:2-8℃。如需保存,则挑取单菌落接种至细菌保存培养基斜面,每月转接1次,5代后应销毁。
■ 产品保存原理
冻存管里的小瓷珠表面多孔,细菌可以很方便的吸附在上面。冻存管接种上细菌后,可放置于-20℃或-80℃环境中长期保存(-20℃可保存一年,-80℃可保存二年)。当需要复苏菌株时,可以很方便的从冻存管中取出单个的小瓷珠,直接接种到合适的细菌培养基上(平板培养基或液体培养基)。
■ 菌株保存
1、瓷珠保存法:
1.1 使用前,用油性笔在每个冻存管上标记上细菌的名称,每支冻存管只可接种一种细菌;
1.2 在无菌条件下,打开冻存管的螺旋瓶盖;
1.3 用接种环挑取18-24小时新鲜细菌纯培养物,放入冻存液中。拧紧瓶盖,来回颠倒使细菌乳化,配成大约3-4麦氏比浊度的菌悬液,此时细菌悬液会吸附在小瓷珠内外表面;
1.4 用无菌移液器将冻存管中的菌悬液尽量吸出。(吸出的菌悬液应放入消毒液中并随后进行高压灭菌处理);
1.5 拧紧瓶盖。记录下接种细菌的详细情况;
1.6 将接种完细菌的冻存管放在-20℃或-80℃冰箱中保存。
2、菌悬液保存法:
将复苏好的试管的菌悬液,用灭菌好的甘油进行封存后放置冰箱2~8℃进行保存,保存时间为1个月。
3、斜面保存法:
将菌悬液用划线方法进行斜面的接种培养后,用灭菌后的甘油进行保存放置冰箱2~8℃进行保存,保存时间为1个月。
■ 菌株复苏
1、取出冻存管并用力摇晃,使管内瓷珠分散。无菌条件下拧开冻存管,用无菌的接种环(接种针)或镊子取出小瓷珠,拧紧瓶盖;
2、尽可能快地将冻存管放回原来的保存环境,温度过多改变将减弱细菌的生存能力;
3、取出的小瓷珠可以直接放在平板培养基上划线接种,或者直接置于适合的液体培养基中培养。
4、复苏菌株时建议一次做3个磁珠,减少复活菌的次数,以免对细菌细胞造成影响,降低菌的活性。
■ 保存条件
1、未经使用的冻存管可在室温保存12个月;已经接种的冻存管在-20℃可保存12个月或-80℃可保存24个月;尽量在三次内完成所有磁珠的接种,冻融多次影响菌株活性,且接种三次后冷藏保存,不可再冷冻保存;
2、在接种之前有如下情况产生,该冻存管不得使用:
a.瓶子有漏液情况发生;
b.冻存管内的冻存保护液混浊;
c.超过有效保存期。
3、小瓷珠一旦从冻存管中取出,不得再放回冻存管中;
4、当丢弃使用过的或部分使用过的冻存管时,应注意生物危险的预防。
5、废弃液经高压灭菌后(121℃,30分钟)丢弃。
■ 备注
1、菌株来源中国医学微生物菌种保藏管理中心的菌株干粉,菌株干粉默认为零代,对干粉菌株进行复活为第一代菌株,第一代菌株进行传代并保存为菌株的第二代即现在的磁珠。
2、菌株为第二代,保质期6个月,如发现污染或不活等现象,请1个月内联系我公司。
3、菌株操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染。
4、本方法仅供参考,视情况可以通过其他合理途径进行传代和保存。
5、本公司出售的菌株仅用于科研、教学及卫生微生物检验质量控制。