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产品名称:pUC18质粒

货号 规格 价格 订购数量 是否现货
ZK110 1μg(20μl,50ng/μl) 580 - + 有货

基本信息

别名:

pUC-18

启动子:

Lac/lac promoter

复制子:

pUC

质粒大小:

2686bp

质粒标签:

LacZ

原核抗性:

Amp

克隆菌株:

DH5a

培养条件:

37度

5'测序引物:

M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT

3'测序引物:

M13R:CAGGAAACAGCTATGACC


质粒属性

质粒宿主:

大肠杆菌

质粒用途:

基因模板

片段类型:

cDNA

片段物种:

空载体

原核抗性:

Amp

真核抗性:

荧光标记:



质粒简介

pUC18是适合于双脱氧法DNA测序的载体,通常运用于重组dna的分子克隆中,首先我们制备大肠杆菌的感受态细胞(能接受外来重组的dna),这种感受态菌株必须不同外来DNA分子发生遗传重组,通常是rec基因缺陷型的突变体,同时它们必须是限制系统缺陷或限制与修饰系统均缺陷的菌株,即具有这三种缺陷(rk mk rec ),同时对氨苄青霉素敏感(ap)。

puc18载体自身带有抗氨苄青霉素基因,而外源片段不具有,这样只有带有puc18的转化子的菌株才能在氨苄青霉素平板上存活,而外源片段自身环化的不能存活,这称为抗性筛选。

pUC18 上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 个氨基酸的编码序列,在这个编码区中插有一个多克隆位点,且不影响正常功能,DH5α感受态菌株带有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的编码信息,当puc18载体在正常情况下同感受态菌株融合后,互补表达有活性的β-半乳糖苷酶,称为α-互补现象,当有外源片段插入多克隆位点后,不能产生互补,即细菌不能产生β-半乳糖苷酶活性。在呈色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷酶)和诱导物IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)的存在下,互补产物菌落呈现蓝色,不互补产物菌落呈白色,很容易鉴别,这种筛选方法称为α-互补现象筛选(蓝白斑筛选)。由上可见,puc18载体除了能重组导入外源片段外,在筛选表达过程中还具有重要的作用。质粒只保证关键序列正确,不保证表达效果。


质粒图谱



质粒序列

质粒序列可参考(具体以测序为准)下载ZK110 pUC18大肠克隆质粒.txt

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