■ 基本信息
别名: | pBR-322 |
复制子: | pBR322 |
质粒分类: | 大肠系列质粒;大肠克隆质粒;基因克隆质粒 |
质粒大小: | 4361bp |
原核抗性: | Amp,Tet |
克隆菌株: | DH5a |
培养条件: | 37度 |
5'测序引物: | PBR322.F(AAGTGCCACCTGACGTCTAA) |
3'测序引物: | PBR322.R (GCCTGCCACCATACCCAC ) |
备注: | 应用很广的基因克隆质粒 |
■ 质粒属性
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 基因模板 |
片段类型: | cDNA
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片段物种: | 空载体
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原核抗性: | Amp,Tet |
真核抗性: |
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荧光标记: |
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■ 质粒简介
pBR322质粒相对分子质量较小,它带有一个复制起始位点,保证了该质粒只在大肠杆菌的细胞中行使复制的功能。具有两种抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,可供转化子的选择标记。具有较高的拷贝数,经过氯霉素扩增以后,每个细胞中可累积1000-3000份拷贝,该特性为重组体DNA的制备提供了极大的方便。同时,由于其为人工构建质粒,虽然带有抗药性基因,但已不能在自然界的宿主细胞间转移,同时应用安全菌株,亦不会引起抗生素抗性基因传播。
pBR322是一个人工构建的重要质粒,有万能质粒之称。它是由pSF2124、pMB1及pSC101三个亲本质粒经复杂的重组过程构建而成的。质粒载体pBR322是研究得最多,使用最早且应用最广泛的大肠杆菌质粒载体之一。符号质粒载体pBR322中的“p代表质粒;“BR”代表两位两位研究者Bolivar和Rogigerus姓氏的字首,“322”是实验编号。
质粒载体pBR322的大小为4361bp,相对分子质量较小的是它第一个优点。优点之二是它带有一个复制起始位点,保证了该质粒只在大肠杆菌的细胞中行使复制的功能。具有两种抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,可供转化子的选择标记是它的第三个优点。质粒只保证关键序列正确,不保证表达效果。
■ 质粒图谱
■ 质粒序列
质粒序列可参考(具体以测序为准)下载:ZK116pBR322大肠克隆质粒.txt