■ 基本信息
启动子: | AOX1 |
复制子: | pBR322 |
质粒分类: | 酵母系列，毕赤酵母表达载体 |
质粒大小: | 9004bp |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: | HIS4 |
克隆菌株: | DH5a |
培养条件: | 37度 |
表达宿主: | 酵母细胞 |
5'测序引物: | AOX5:GACTGGTTCCAATTGACAAGC |
3'测序引物: | AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT |
■ 质粒属性
质粒宿主: | 酵母菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: |
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片段物种: |
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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荧光标记: |
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■ 质粒简介
PIC3.5K是一个鉴定多拷贝基因插入到毕赤酵母基因组中的载体。
1.pPIC3.5K载体大小为9004 bp。
2.在多克隆位点区域，拥有5个单一的限制性酶切位点：BamH I，Snab I，EcoR I，Avr II和Not I。
3.胞内表达。
4.载体构建时，需要包含一个ATG启动子，同时需要加入Kozak序列。 (Cavener and Stuart, 1991; Kozak, 1987; Kozak, 1990)
5.毕赤酵母中使用HIS4基因筛选。
6.将基因插入GS115和KM71的AOX1中，需要使用Sac I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+，KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。
7.将基因插入GS115和KM71的HIS4中，需要使用Sal I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+，KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。
8.将基因插入GS115的AOX1基因中，也可以使用Bgl II限制酶线性化质粒，产生的酵母基因型为His+ MutS。
■ 质粒图谱
■ 质粒序列
质粒序列请下载：
ZK920pPIC3.5K毕赤酵母质粒.txt
