■ 基本信息
别名: | pETGST |
启动子: | T7 |
复制子: | pBR322 |
终止子: | T7 terminator |
质粒分类: | 大肠杆菌载体;PET系列表达质粒 |
质粒大小: | 3.7kb |
质粒标签: | N-GST,C-6×His,N-P3C |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5α |
培养条件: | 37℃ |
表达宿主: | BL21(DE3) |
诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
5'测序引物: | T7:TAATACGACTCACTATAGGG |
3'测序引物: | T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
■ 质粒属性
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | 基因CDS
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片段物种: | 空载体
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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荧光标记: |
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■ 质粒简介
pET—GST表达载体采用T7启动子和GST融合表达,同时选用人鼻病毒14亚型3C蛋白酶专一性切割位点。此外,C端还添加了6个His,便于采用chelating sepharose亲和层析。本载体表达的融合蛋白可采用吸附GST的亲和层析和6个His的chelating sepharose双重亲和层析,极大地方便了下游纯化。GST融合表达背景文献在medline里极为丰富,有数百个基因采用GST融合表达成功。
■ 质粒图谱
■ 质粒序列
部分序列,仅供参考:
1 tccccgcgcg ttggccgatt cattaatgca ggatctcgat cccgcgaaat taatacgact
61 cactataggg agaccacaac ggtttccctc tagatcacac aggaaacagt attcatgtcc
121 cctatactag gttattggaa aattaagggc cttgtgcaac ccactcgact tcttttggaa
181 tatcttgaag aaaaatatga agagcatttg tatgagcgcg atgaaggtga taaatggcga
241 aacaaaaagt ttgaattggg tttggagttt cccaatcttc cttattatat tgatggtgat
301 gttaaattaa cacagtctat ggccatcata cgttatatag ctgacaagca caacatgttg
361 ggtggttgtc caaaagagcg tgcagagatt tcaatgcttg aaggagcggt tttggatatt
421 agatacggtg tttcgagaat tgcatatagt aaagactttg aaactctcaa agttgatttt
481 cttagcaagc tacctgaaat gctgaaaatg ttcgaagatc gtttatgtca taaaacatat
541 ttaaatggtg atcatgtaac ccatcctgac ttcatgttgt atgacgctct tgatgttgtt
601 ttatacatgg acccaatgtg cctggatgcg ttcccaaaat tagtttgttt taaaaaacgt
661 attgaagcta tcccacaaat tgataagtac ttgaaatcca gcaagtatat agcatggcct
721 ttgcagggct ggcaagccac gtttggtggt ggcgaccatc ctccaaaatc ggacagcatg
781 ccagactctc tcgaagttct gtttcagggt ccagcaggat ccgcagaatt cagcgctagc
841 caccatcatc atcatcatta agcttgatcc ggctgct
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