■ 基本信息
别名: | pColdI |
启动子: | CSPA |
复制子: | pBR322 |
质粒分类: | 大肠系列质粒；大肠表达质粒；pCold系列质粒 |
质粒大小: | 4407bp |
质粒标签: | N-His, N-Factor Xa |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培养条件: | 37度，37℃，有氧，LB |
表达宿主: | BL21等大肠杆菌 |
诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
5'测序引物: | pCold-F（ACGCCATATCGCCGAAAGG） |
3'测序引物: | pCold-R（GGCAGGGATCTTAGATTCTG） |
功能简介:
| 大肠杆菌表达空载体 |
备注: | 冷启动表达质粒 |
■ 质粒属性
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF
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片段物种: | 空载体
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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荧光标记: |
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■ 质粒简介
当培养的大肠杆菌的温度充分降低，几乎暂时停止生长大部分的蛋白表达减少，而此时一组蛋白质称为“冷休克蛋白”被专门诱导表达。冷休克表达载体，pCold I-IV，是利用冷休克基因CSPA启动子设计高效率蛋白质表达载体。 CSPA的启动子的下游处，插入了lac操纵子，以便严格控制表达。此外，5'非翻译区（5'UTR），翻译增强元件（TEE），His标签序列，Xa因子切割位点和多克隆位点（MCS）位于在CSPA启动子的下游的。由于该产品采用了大肠杆菌的启动子，大多数大肠杆菌菌株可被用作表达宿主。有四种类型的pCold载体，他们的下列原件的位置稍有不同，TEE，His标签序列和Factor XA酶切位点。
pColdI质粒是利用冷休克基因CSPA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在启动子下游处，插入了lac操纵子，以便严格控制表达。此外，5’非翻译区（5’UTR），翻译增强元件（TEE）,His标签序列，Xa因子切割位点和多克隆位点（MCS）位于CAPS启动子的下游。当培养温度切换到低温时，大肠杆菌暂时停止生长，大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少，但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。
■ 质粒图谱
■ 质粒序列
质粒序列请下载：
ZK1588 pCold I大肠表达质粒.txt
