■ 基本信息
别名: | pET-Duet |
启动子: | T7 |
复制子: | pBR322 |
终止子: | T7 terminator |
质粒分类: | 大肠杆菌载体;双表达框质粒 |
质粒大小: | 5420bp |
质粒标签: | N-6×His,C-S |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培养条件: | 37度,37℃,有氧,LB |
表达宿主: | BL21(DE3) |
诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
5'测序引物: | pET Upstream:ATGCGTCCGGCGTAGA DuetUP2:TTGTACACGGCCGCATAATC |
3'测序引物:
| DuetDOWN1:GATTAGCGGCCGTGTACAA T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
备注: | 同时表达两个外源蛋白 |
■ 质粒属性
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF
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片段物种: | 多框空载
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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荧光标记: |
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■ 质粒简介
pETDuet-1载体被设计用来在大肠杆菌中同时表达两个外源基因. 载体含有两个多克隆位点,每一个多克隆位点是通过T7启动子/Lac操纵子和一个核糖体结合位点组成。pETDuet-1携带有pBR322质粒来源的ColE1复制子, lacI基因和氨苄抗性基因。本载体可以与pACYCDuet-1载体联合使用,在合适的宿主菌中,可以一起共表达至多4个目的基因。插入在pETDuet-1载体多克隆位点1的目的基因可以使用pET Upstream 引物和DuetDOWN1 引物进行测序,插入在多克隆位点2的目的基因可以通过DuetUP2 引物 和T7 Terminator 引物进行目的基因测序。
■ 质粒图谱
■ 质粒序列
质粒序列请下载:ZK1684 pETDuet-1大肠双表达质粒.txt