■ 基本信息
别名: | pRSFDuet1 |
启动子: | T7 |
复制子: | RSF |
终止子: | T7 terminator |
质粒分类: | 大肠系列质粒；大肠其它质粒；大肠双框质粒 |
质粒大小: | 3829bp |
质粒标签: | N-6×His，C-S |
原核抗性: | Kan |
克隆菌株: | DH5a |
培养条件: | 37度，37℃，有氧，LB |
表达宿主: | BL21(DE3)等大肠杆菌 |
诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
5'测序引物: | ACYCDuetUP1-F(GGATCTCGACGCTCTCCCT) DuetUP2-F( TTGTACACGGCCGCATAATC) |
3'测序引物:
| DuetDOWN1-R( GATTATGCGGCCGTGTACAA) T7-ter-R( TGCTAGTTATTGCTCAGCGG) |
备注: | 同时表达两个外源蛋白 |
■ 质粒属性
质粒宿主: | 大肠杆菌 |
质粒用途: | 蛋白表达 |
片段类型: | ORF
|
片段物种: | 多框空载
|
原核抗性: | Kan |
真核抗性: |
|
荧光标记: |
|
■ 质粒简介
pRSFDuet-1质粒是一种原核表达载体， N端含有一个6×His标签，C端含有一个S标签。该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。
该质粒还携带有RSF复制因子、lacI基因和氯霉素抗性基因。可以使这个pETDuet-1载体在一个适当的宿主菌株的coexpression 4目标基因插入MCS1的基因可以使用ACYCDuetUP1引物和DuetDOWN1引物进行测序。插入MCS2的基因可以用DuetUP2引物和T7进行排序。
pRSFDuet-1 is designed for the coexpression of two target ORFs. The vector contains two multiple cloning sites (MCS), each of which is preceded by a T7lac promoter and ribosome binding site (rbs). The vector also carries the RSF1030-derived RSF replicon, lacI gene and kanamycin resistance gene (KnR). This vector can be used in combination with pACYCDuet™-1 , pCDFDuet™-1 , and pETDuet™-1 in an appropriate host strain for the coexpression of 4 to 8 target proteins. ORFs inserted into MCS1 can be sequenced using the ACYCDuetUP1 Primer and DuetDOWN1 Primer . ORFs inserted into MCS2 can be sequenced using the DuetUP2 Primer and T7 Terminator Primer . Unique sites are shown on the circle map.
■ 质粒图谱
■ 质粒序列
质粒序列请下载：
ZK1686 pRSFDuet-1大肠双表达质粒.txt
