■ 基本信息
细胞名称: | A-549、A549人肺癌细胞 |
背景资料: | 该细胞系是1972年由Giard DJ通过肺癌组织移植培养建系的，源自一位58岁的白人男性。A549能通过胞苷二磷脂酰胆碱途径合成富含不饱和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白阳性。 |
细胞来源: | ATCC CCL-185 |
代次: | P3 |
STR鉴定: | 已通过 |
规格: | ①1ml冻存 ②T25复苏 |
细胞数: | 1x10^6 cells |
生物安全级别: | 2 |
组织来源: | 肺癌 |
细胞形态: | 贴壁；上皮细胞样 |
细胞活力: | 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion） |
细胞检测: | 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
培养条件: | F12K +10% FBS+1%P/S；37℃，5% CO2 |
传代方法:
| 建议1:2-1:3 两天换液一次 |
冻存条件: | 90%FBS+10%DMSO |
■ 运输
冻存细胞：干冰运输，液氮保存（或-80℃冰箱不超过1周）
复苏细胞：常温运输
T25 瓶细胞处理方法：
收到细胞后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：
1）75% 酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部。
2）将细胞放入 37 度培养箱中预温 3-4 小时后再做处理，以稳定细胞状态。
3）显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200× 各一张）
前三天照片为重要售后依据，不提供或未拍照默认收到状态良好。
4）贴壁细胞：若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第三步中准备的 5-6ml 培养基。放到 37 度培养箱培养 。待细胞密度达到 80% 以上，进行传代。密度达到 80% 以上，将细胞传代培养。
悬浮细胞：将瓶内所有培养基离心收集，重悬计数根据密度进行分瓶，密度在3x105/ml 为宜。
收到第一次传代比例建议 1:2，之后可根据细胞密度和增殖情况适当调整。
注：
培养瓶内非完全培养基，请务必使用新鲜培养基。 收到细胞后如细胞状态不佳或培养中遇到问题，请当天反馈并提供图片，且保存前三天照片以便分析。7 天内反馈，细胞本身问题免费重发如人为原因导致可根据实际情况酌情处理；7 天内未接到任何反馈视为合格，不予免费售后。
冻存管收到处理方法：
收到细胞后，检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：检查干冰挥发情况，将细胞取出转移至 -80 度冰箱 ( 不超过一周）或液氮保存 ,建议尽早复苏。复苏后有活性状态问题及时与我们联系，免费重发一管并有技术人员与您沟通指导复苏第二管。
