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耐热DNA聚合酶简介

发布者:庄盟生物发布时间:2015-04-09浏览次数:2181次

合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素,如何选择最合适的耐热DNA聚合酶,是用户首先考虑的问题。目前市面上有多种DNA聚合酶,虽然名称各不相同,但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。

我公司生产的5种耐热DNA聚合酶全部采用国外生产工艺和质量检测标准生产;是经过多次分子筛,离子交换层析柱纯化的,去除了宿主DNA和蛋白酶等杂质的超纯型产品。特异性非常好,且特别稳定。经检测,室温放置1个月,活性不发生改变。


五种耐热DNA聚合酶比较:

Taq

扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,能很好地扩增6kb以下的DNA片段。

Pfu

目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,但扩增效率低于Taq酶,能很好的扩增2kb以下的片段。一般用于点突变,基因筛选等对保真性要求很高的DNA扩增。

Taq Plus

集高效扩增和高保真度于一体,能有效地扩增10kb以下的片段,扩增效率比Pfu高,保真度比Taq酶好,对于有些结构复杂的模板,如GC含量高,有二级结构等可选用Taq Plus扩增。

HotStart

采用了创新的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式,可逆性地阻断酶的活性。能最大限度的减少PCR扩增全过程中的非特异性扩增,大大提高了PCR反应的特异性。能很好地扩增6kb以下的DNA片段,PCR产物 3'端加A,可直接用于TA载体克隆。

Long Taq

具有3'到5'外切酶活性的耐热DNA聚合酶,它不但扩增效率高而且错配率低,对简单模板可扩增长达40kb的片段,对复杂模板也可扩增长达15kb的片段,特别适合于长片段的扩增,如构建基因图谱及分子遗传学研究等。


耐热DNA聚合酶长度、扩增效率和保真度比较

项目

Pfu

HotStart Taq

Taq

Taq Plus

Long Taq

DNA

良好地扩增

3kb

8kb

8kb

20kb

25kb

可能扩增

5kb

12kb

12kb

30kb

40kb

Genomic DNA

良好的扩增

2kb

6kb

6kb

10kb

20kb

可能扩增

4kb

8kb

8kb

20kb

40kb

扩增效率

+

+++

++++

+++

++++

保真度比较

10

1

1

5

3


注:   Pfu酶的保真度设置为10